Od ELISA test je medicinski laboratorijski pregled, ki ima za posledico tako imenovano reakcijo antigen-protitelo. Lahko se preskusijo različni antigeni, ki igrajo vlogo v humani ali veterinarski medicini. V Nemčiji so za izvajanje testa pooblaščeni le pooblaščeni laboratorijski inštituti.
Kaj je postopek?
ELISA je okrajšava za Encimski imuno sorbentni test. To je torej angleško ime, vendar se je uveljavilo v nemški medicinski rabi.
Test ELISA je ena izmed tako imenovanih imunoloških metod v okviru laboratorijskih testov. Testni postopek lahko uporabimo za odkrivanje beljakovinskih molekul v najrazličnejših telesnih tekočinah. Odkrivanje teh molekul omogoča, da se sklepajo o določenih boleznih ali kliničnih slikah, zato tudi zdravniki svojo diagnozo postavijo v odvisnost od rezultata takega testa ELISA. Preskusni postopek je zato zelo pomemben v vsakodnevni klinični praksi, ambulantno ali bolnišnično.
Ustrezne telesne tekočine, na primer polna kri ali tekočine iz sklepov, se po odvzemu bolnika pošljejo neposredno v laboratorij. Vzorci so običajno zelo nujni, saj matični material velja za občutljiv in ga je treba čim prej pregledati. Tako imenovani prekrivni vzorci lahko privedejo do lažno negativnih rezultatov, ker so se patološki proteini, ki jih je treba odkriti, medtem zmanjšali ali popolnoma razgradili. Tako imenovana predhodna analiza ima pomembno vlogo pri ELISA, sumljive ali negativne rezultate je treba znova ponoviti, če obstajajo klinični simptomi.
Funkcija, učinek in cilji
Epruvete in tako imenovane mikrotitrske ploščice so bistvenega pomena za pravilno testiranje v pooblaščenem medicinskem laboratoriju. Te plošče z drobnimi, pol vbočenimi vdolbinami so narejene iz posebne plastike in so vsake prevlečene z zelo specifičnim protitelesom.
Če je antigen, ki ga je treba zaznati, prisoten v telesni tekočini, ki jo je treba pregledati, pride do specifične reakcije antigen-protitelo po tako imenovanem principu ključavnice in ključa. Laboratorijsko osebje lahko vzorčni material vnese v plošče bodisi ročno s pomočjo pipete ali popolnoma samodejno. V sodobnih medicinskih laboratorijskih inštitutih se za diagnostiko ELISA uporabljajo samo popolnoma avtomatizirani sistemi.
Vendar jih mora nadzorovati usposobljeno osebje, medicinsko-tehnični laboratorijski pomočniki. Za tako imenovani notranji in zunanji nadzor kakovosti je odgovorno tudi laboratorijsko osebje, ki je nadrejeno medicinskemu osebju za laboratorijsko medicino, epidemiologijo okužb in mikrobiologijo. Po prvem poskusu, tj. Po tem, ko je bil material pipetiran na plošče, so se specifični antigeni v vzorcu, če obstajajo, že vezali na protitelesa na plastični plošči.
Sledi cikel pranja s fiziološko fiziološko raztopino, da odstranimo moteče dejavnike, kot so neželeni antigeni ali proteini iz šarže. Ta korak je zelo pomemben, da se izognete lažnim pozitivnim reakcijam. Domnevno pozitiven rezultat, ki ga laboratorij napačno razlaga, ima lahko v določenih okoliščinah za bolnika usodne posledice. V drugem koraku preiskave dodamo nadaljnje protitelo, ki je povezano z encimom. To označeno protitelo se veže tudi na antigen.
V tretjem in zadnjem koraku dodamo posebno barvilo v določeni količini, ki se v večji ali manjši meri razgradi na preostale encimske ostanke. Lahko se razgradi le tisti encim, ki prej ni bil vezan na antigen skupaj s protitelesom. Prosti encim lahko cepi dodano barvilo. Natančno količino razcepljenega barvila lahko določimo z nadaljnjo medicinsko laboratorijsko metodo, tako imenovano fotometrijo. To omogoča natančen sklep o tem, ali in koliko antigena je v vzorčnem materialu.
Test ELISA se ne uporablja samo za začetno diagnozo ali za utemeljitev domnevnih diagnoz pri določenih boleznih in kliničnih slikah, ampak tudi za spremljanje njihovega napredka. Če koncentracija antigena v testu med terapijo postane nižja, se terapija šteje za uspešno.
Tu lahko najdete svoja zdravila
➔ Zdravila za krepitev obrambnega in imunskega sistemaTveganja, neželeni učinki in nevarnosti
Test ELISA je še posebej informativen, ker odkrivamo antigene strukture v telesnih tekočinah. Test omogoča tako imenovano kvalitativno, pa tudi polkvantitativno in kvantitativno izjavo o domnevni prisotnosti nekaterih antigenov v telesnih tekočinah.
Polne krvi ni mogoče uporabiti za pregled, le krvni serum. Neposredni test na pacienta, na primer iz kapilarne krvi prstnega odtisa, tako kot pri nekaterih drugih seroloških preiskavah doslej ni mogoč. V humani medicini se test ELISA uporablja predvsem za odkrivanje antigenov pri bakterijskih, virusnih ali glivičnih okužbah. Poleg tega se vsi pozitivni rezultati serologije hepatitisa ponovno preverjajo z testom ELISA kot standardom.
Nekateri hormoni, na primer nosečniški hormon HCG, se lahko določijo tudi z testom ELISA. Če se med nosečnostjo pojavijo določeni zapleti, je natančno poznavanje koncentracije nosečniškega hormona v krvi zelo koristno diagnostično in terapevtsko. Druge indikativne točke za test je odkrivanje tako imenovanih paraproteinov v urinu, saj se pojavljajo na primer pri različnih tumorskih boleznih, kot je multipli mielom.
Preizkus ELISA še danes poteka v mnogih laboratorijskih inštitutih, vendar ga strokovnjaki štejejo za zastarele. Z encimom povezano imunsko reakcijo v testu ELISA v zadnjih letih vse bolj nadomeščajo radioaktivno označena protitelesa, ki zagotavljajo še boljše količinske rezultate. Ti testi so znani tudi kot RIA, Radio Immunoabsorbent Test. Nadaljnji posebni nadaljnji razvoj ELISA so lahko-kemijske metode, kot so luminiscenca ali fluorescenca.
